日粮油脂调控肉鸡肠道粘膜免疫和免疫应激信号传导的研究

摘要

本论文通过四个试验研究了日粮添加不同类型油脂对肉仔鸡肠道粘膜免疫和免疫应激反应的调控作用及其作用机制。在淋巴细胞信号传导通路上探讨鱼油影响肉仔鸡免疫应激反应的作用机制。 试验一 观察了日粮添加不同油脂对肉仔鸡抵抗柔嫩艾美耳球虫(E. tenella)的作用效果。504只1日龄ArborAcres(AA)雄性肉仔鸡被随机分为7个处理，除对照组(未添加油脂)以外的各试验处理日粮中分别添加禽脂25 g/kg、禽脂45g/kg、玉米油25 g/kg、玉米油45 g/kg、鱼油25 g/kg和鱼油45 gig。日粮添加45 g/kg、25 g/kg的鱼油和45g/kg米油与添加不同水平禽脂相比，显著降低了因感染E. tenella的死亡率。禽脂组肉仔鸡死亡率明显高于对照组。肉仔鸡感染球虫一周后，禽脂组血液红细胞压积显著低于对照组，鱼油组和玉米油组。两个鱼油组血清IL-6水平明显高于两个禽脂组。不同添加水平的鱼油组和玉米油组血液类胡萝卜素水平明显低于对照组和两个禽脂组。肉仔鸡接种球虫7天后，鱼油和玉米油提高了肉仔鸡肠腔E. tenella特异性sIgA抗体；禽脂组肉仔鸡血清E tenella特异性IgG抗体明显低于对照组。本试验结果表明：45 g/kg的鱼油和玉米油有利于肉仔鸡抵抗球虫感染，日粮中添加饱和油脂(禽脂)不利于感染E tenella球虫肉仔鸡的存活。 试验二 研究了日粮添加45 g/kg的禽脂、鱼油和玉米油对肉仔鸡肠道粘膜免疫反应的调控作用。180只1日龄AA雄性肉仔鸡随机分为3个处理，各处理日粮分别添加禽脂45 g/kg、玉米油45 g/kg和鱼油45g/kg。鱼油较玉米油能极显著增加肠道粘膜淋巴细胞中双阳性CD3<'+>CD4<'+>细胞群比例；较鱼油组和禽脂组，玉米油能显著增加21d和42 d肉仔鸡肠道粘膜淋巴细胞双阳性CD3<'+>CD8<'+>细胞群；鱼油能明显增强21d和42d肉仔鸡经ConA刺激的T细胞分泌IL-2;鱼油组21d肠道粘膜降钙素基因相关肽(cGRP)mRNA含量显著低于玉米油组；鱼油组42d肠道粘膜cGRP mRNA含量明显低于玉米油组和禽脂组。日粮玉米油显著增强肉仔鸡21、42日龄的肠道淋巴细胞腺苷酸环化酶(AC)活性；与玉米油比较，鱼油则抑制了肉仔鸡21、42日龄的肠道淋巴细胞AC活性。21日龄时，玉米油组肠道淋巴细胞cAMP水平明显高于鱼油组和禽脂组：在42日龄，鱼油组肠道淋巴细胞cAMP水平显著低于禽脂和玉米油组。日龄添加玉米油显著增加肠道组织PGE2水平。结果表明：鱼油和玉米油在肠道粘膜神经肽(cGRP)mRNA含量上的相反作用，调控肉仔鸡肠道粘膜层淋巴细胞AC活性和信使分子cAMP水平，影响淋巴细胞分化群分布和细胞因子(IL-2)分泌，调节肠道粘膜免疫功能。 试验三 观察了日粮鱼油对免疫应激肉仔鸡生长性能、免疫反应和炎性介质的影响，旨在探讨不同类型油脂是否有缓解肉仔鸡免疫应激的作用。288只1日龄AA肉仔鸡采用2×2因子设计，主效应分别为脂肪类型(45g/kg鱼油或45g/kg玉米油)和免疫应激(注射LPS或生理盐水)。在第20和27日龄先后两次注射LPS应激源或生理盐水作对照。结果显示，LPS刺激降低了第21-28日龄的采食量和21-42日龄的体增重；鱼油改善了第一次LPS刺激后肉仔鸡第四周料重比。鱼油能缓解免疫应激肉仔鸡的淋巴细胞转化率增加。LPS刺激后，日粮鱼油缓解了由LPS刺激诱导的CD3<'+>CD4<'+>/CD3<'+>CD8<'+>比值升高。日粮鱼油能阻止因注射LPS引起的肉仔鸡血浆IL-6和VNF-α含量升高。结果表明，鱼油缓解了因LPS刺激导致的肉仔鸡生长性能降低和免疫应激反应，同时下调前炎性细胞因子的合成。试验四从脾脏淋巴细胞膜信号转导相关酶、信号分子水平探讨鱼油缓解肉仔鸡免疫应激反应的细胞信号传导通路的细胞生化、分子机理。结果表明：第二次LPS刺激后，28日龄脾脏亚油酸(LA)和花生四烯酸(AA)水平显著下降，二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)水平显著升高。脂肪类型对脾脏细胞膜流动性的影响与LPS刺激无显著互作。前后两次。LPS刺激，鱼油降低了LPS刺激而导致的前列腺素2(PGE2)水平上升和环氧合酶2(COX-2)活性增强。与玉米油比较，鱼油显著降低了LPS刺激而导致的钙依赖型PLC活性上升。鱼油有效缓解因注射LPS而导致的三磷酸肌醇(IP3)水平急剧上升。两次LPS刺激显著提高了肉仔鸡脾脏核因子<,κ>B(NF<,κ>B)mRNA相对含量；鱼油显著降低了LPS刺激而导致的NF<,κ>B mRNA上升。本试验结果表明：鱼油通过下调PLC途径信号分子(IP3等)的合成、抑制COX2活性、降低炎性介质(PGE2)的产生，并在转录水平缓解免疫应激肉仔鸡NF<,κ>B的表达，发挥缓解肉仔鸡免疫应激的作用。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词表

声明

第一章绪论

1研究目的和意义

2国内外研究现状

3研究内容与方法

第二章试验研究

试验一 日粮添加不同油脂对肉仔鸡抵抗球虫感染的作用研究

1材料与方法

2试验结果

3讨论

4小结

试验二 日粮添加不同油脂对肉仔鸡肠道粘膜免疫反应的影响

1材料与方法

2试验结果

3讨论

4小结

试验三、日粮添加不同油脂对免疫应激肉仔鸡生长性能和免疫反应的影响

1材料与方法

2试验结果

3讨论

4小结

试验四 日粮鱼油调控免疫应激肉仔鸡免疫反应的信号传导机制

1材料与方法

2试验结果

3讨论

4小结

第三章结论与建议

1本研究的主要结论

2本研究的创新点

3有待进一步研究的问题

附录

参考文献

致谢

个人简历