麻花秦艽资源调查和种质保存技术研究

摘要

目的:摸清麻花秦艽野生资源分布现状,提高麻花秦艽种子萌发能力,建立麻花秦艽休眠芽玻璃化超低温保存技术体系。
　　方法:根据收集资料设计6条调查路线30个调查地点,进行实地踏查、走访调查、详查、采集标本和样品。整理麻花秦艽的开发历史,研究麻花秦艽的开发现状和开发前景,提出麻花秦艽的保护策略。采用高锰酸钾和超声共同处理种子以提高种子萌发能力。采用单因素试验设计,以麻花秦艽休眠芽为材料建立玻璃化超低温保存技术体系。
　　结果:1.麻花秦艽主要分布于甘肃省兰州、定西、甘南藏族自治州、酒泉、武威、张掖、临夏。青海省湟源、共和、贵德、互助。甘肃、青海野生资源主要分布在动植物自然保护区及封山育林区内。在甘肃西南部、青海藏区,麻花秦艽野生资源保护良好。在甘肃中部地区,麻花秦艽根作为秦艽药材,野生资源受到采挖、放牧、垦荒等影响,如今只有在保护区内能看到。
　　2.麻花秦艽种子先采用蒸馏水浸泡24 h,20℃,再用超声仪处理,频率40 kHz,功率60 W,20 min,最后用1.5％高锰酸钾溶液浸泡10 min,能够显著提高种子萌发能力。
　　3.建立了麻花秦艽休眠芽玻璃化超低温保存技术体系,在冻存时应采用经过寒冬锻炼且未萌动的休眠芽,本文采用3月份的休眠芽,先将5~11 mm大小的休眠芽在含有0.3 mol·L-1、0.5 mol·L-1、0.7 mol·L-1蔗糖MS培养基上暗培养各1 d,在装载液(2 mol·L-1甘油+0.4 mol·L-1蔗糖)中20℃处理20 min,于玻璃化保护液PVS2(30%甘油+15%乙二醇+15%二甲基亚砜+0.4 mol·L-1蔗糖)中0℃处理40 min,换新鲜PVS2直接投入液氮。采用40℃水浴化冻2~3 min,用含1.2 mol·L-1蔗糖的MS无机盐液体培养基洗涤2次,每次10 min,用无菌滤纸吸干芽表面的溶液后接种到恢复生长培养中( MS+0.5 mg·L-16-BA+0.1 mg·L-1 NAA),22℃暗培养7 d后转入正常光照培养,再生率高达83.3%。
　　结论:1.针对麻花秦艽的资源分布及蕴藏量现状,建议开展麻花秦艽野生种质资源保护研究,建立野外保护区,兴建种苗繁育场,为生产提供优质种苗,在适宜地区推广人工种植技术,加快品系选育及规范化种植研究。
　　2.高锰酸钾和超声波协同处理有助于麻花秦艽种子萌发能力的提高。
　　3.玻璃化超低温保存方法对龙胆属秦艽组的植物种质资源保存具有一定的指导意义,为建立保存秦艽种质资源提供一种先进的方法。

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前言

第一章 文献综述

1 .1 麻花秦艽资源情况

1.2 麻花秦艽的植物学特性

1.3 鉴别研究

1.4 麻花秦艽化学成分研究

1.5 麻花秦艽分子生物学研究

1.6 麻花秦艽临床研究

1.7 植物离体繁殖及其应用

1.8 种质资源的保存研究进展

1.9 本课题研究的目的和意义

第二章 麻花秦艽资源调查研究

2.1 麻花秦艽资源调查研究

2.2 调查所使用的方法

2.3 调查结果与分析

2.4 麻花秦艽的保护策略

第三章 高锰酸钾和超声波共同处理对麻花秦艽种子萌发的影响

3.1 材料与试剂

3.2 发芽指标

3.3 试验方法

3.4 结果

3.5 讨论

第四章 麻花秦艽休眠芽的玻璃化超低温保存及植株再生

4.1 材料与仪器

4.2 方法

4.3 结果与分析

4.4 讨论

结论

参考文献

攻读硕士期间参加科研项目与发表学术论文

致谢