奶牛乳房炎主要病原菌分离鉴定及其多联苗抗体检测研究

摘要

奶牛乳房炎是奶牛的常见病和多发病之一，因其病因复杂，难以防治，给奶牛养殖业带来了巨大的经济损失，还危害到人类健康。利用疫苗来预防和控制奶牛乳房炎是一种安全、经济、有效的方法。本研究对奶牛乳房炎主要病原菌进行了分离鉴定，初步建立了间接ELISA检测乳房炎多联苗抗体的方法，为客观评价疫苗效果及其深入研究提供了科学依据。 采集大型奶牛养殖场的临床型和隐性乳房炎乳样89份，对其主要病原菌进行了分离鉴定及药敏试验。结果5份乳样未检出细菌，其余84份主要分离出无乳链球菌、停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等共计137株，其中无乳链球菌52株，占37.96％：停乳链球菌20株，占14.60％；金黄色葡萄球菌29株，占21.17％；大肠杆菌22株，占16.06％；其它14株，占10.21％。链球菌、葡萄球菌和大肠杆菌占了所分离菌的89.79％，是奶牛奶牛乳房炎的主要病原菌。药敏试验结果表明：先锋霉素V、新霉素、环丙沙星、丁胺卡那霉素对4种主要病原菌高度敏感，而青霉素G、链霉素、氨苄西林和复方新诺明低度或不敏感，产生耐药性，并且结合实际情况，探讨了奶牛乳房炎的综合防控措施，为奶牛乳房炎的防治提供参考依据。 利用超声波破碎法制备无乳链球菌、停乳链球菌和金黄色葡萄球菌三可溶性抗原，根据常规的ELISA方法，通过反应体系的优化，初步建立了间接ELISA检测奶牛乳房炎多联苗抗体的方法。结果表明该方法特异性强，稳定性好，三可溶性抗原反应体系一致，确定了最佳反应条件：三抗原最适包被浓度4.0～6.0μg/mL，4℃包被作用24h；封闭液为1％BSA-PBST，37℃封闭30min；血清最适稀释度1:200，酶标二抗工作浓度1:20 000，分别37℃作用30min；TMB底物系统显色测定。

目录

文摘

英文文摘

声明

第一部分文献综述

第一章奶牛乳房炎的研究现状

1乳房炎的概念、分类及临床、组织变化

2奶牛乳房炎的病因及发病机理

3奶牛乳房炎的诊断和检测方法

4奶牛乳房炎的综合防治

第二章奶牛乳房免疫机制及其疫苗的研究进展

1奶牛乳腺免疫学机制

2乳房炎疫苗的研究现状

第二部分实验研究

第三章奶牛乳房炎主要病原菌的分离鉴定及其药敏试验研究

1材料

2方法

3结果

4讨论

第四章间接ELISA检测奶牛乳房炎多联苗抗体方法的研究

1材料

2方法

3结果

4讨论

结论

致谢

参考文献

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