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豆粕替代鱼粉对花鲈生长性能和肠道健康的影响

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摘要

第1章 引言

1.1 肠道健康

1.1.1 肠道的屏障功能

1.1.2 肠道组织形态

1.1.3 肠道的炎性反应

1.1.4 肠道菌群结构

1.2 豆粕替代鱼粉对鱼类肠道健康和营养物质消化吸收的影响

1.2.1 豆粕替代鱼粉对鱼类肠道健康的影响

1.2.2 肠道健康与营养物质消化吸收的关系

1.3 本试验的研究目的与内容

1.3.1 研究目的与意义

1.3.2 研究内容

1.3.3 技术路线

第2章 豆粕替代鱼粉对花鲈生长性能、消化酶、消化率的影响

2.1 前言

2.2 试验鱼来源与驯化

2.2.1 试验饲料

2.2.2 试验管理

2.2.3 样品采集

2.2.4 样品分析测定方法

2.2.5 计算及数据统计分析方法

2.3 结果

2.3.1 饲料中豆粕替代鱼粉对花鲈生长性能的影响

2.3.2 饲料中豆粕替代鱼粉对花鲈体组成的影响

2.3.3 饲料中豆粕替代鱼粉对花鲈肠道消化酶活力的影响

2.3.4 饲料中豆粕替代鱼粉对花鲈营养物质和能量表观消化率的影响

2.4 讨论

2.5 小结

第3章 豆粕替代鱼粉对花鲈肠道组织形态及机械屏障的影响

3.1 前言

3.2 材料与方法

3.2.1 试验饲料

3.2.2 试验管理

3.2.3 样品采集

3.2.4 样品分析测定方法

3.2.5 统计分析

3.3 结果

3.3.1 饲料中豆粕替代鱼粉对花鲈肠道形态学的影响

3.3.2 饲料中豆粕替代鱼粉对花鲈肠道组织结构的影响

3.3.3 豆粕替代鱼粉对花鲈血清D-乳酸浓度和二胺氧化酶(DAO)活性的影响

3.4 讨论

3.5 小结

第4章 豆粕替代鱼粉对花鲈肠道氨基酸、小肽转运载体和炎性因子基因表达量的影响

4.1 前言

4.2 材料与方法

4.2.1 试验饲料

4.2.2 试验管理

4.2.3 样品采集

4.2.4 样品的分析测定方法

4.2.5 数据统计分析方法

4.3 结果

4.3.1 豆粕替代鱼粉对花鲈营养物质转运载体基因表达量的影响

4.3.2 豆粕替代鱼粉对花鲈促炎因子基因表达量的影响

4.3.3 豆粕替代鱼粉对花鲈抗炎因子基因表达量的影响

4.4 讨论

4.5 小结

第5章 豆粕替代鱼粉对花鲈肠道微生物菌群的影响

5.1 前言

5.2 材料与方法

5.2.1 试验饲料

5.2.2 试验管理

5.2.3 样品采集

5.2.4 肠道总菌DNA的提取

5.3 结果

5.4 讨论

5.5 小结

全文总结

致谢

参考文献

在学期间研究成果情况

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摘要

本试验以初重为(6.07±0.03g)的花鲈为养殖对象,研究豆粕替代鱼粉对花鲈生长及肠道健康的影响。用豆粕替代饲料中0(D1)、50%(D2)和75%(D3)的鱼粉,配制3种等氮(粗蛋白43%)等脂(粗脂肪13%)的试验饲料,实验分为3个处理,每个处理3个重复,每个重复20尾鱼,饱食投喂2次/天(08:30和18:00),试验周期8周。主要研究结果如下:
  1.豆粕替代鱼粉对花鲈生长性能、体组成、消化酶活性和表观消化率的影响
  花鲈的增重率(WG)、特定生长率(SGR)、饲料效率(FE)、蛋白质效率(PER)和成活率(SR)的最低值和最高值分别出现在D3组和D1组。D3组花鲈体内水分和灰分的含量显著高于其他组,蛋白和脂肪含量显著低于其他组(P<0.05)。花鲈肠道消化酶活力随豆粕替代量的升高而降低。花鲈对饲料蛋白、能量和干物质表观消化率随豆粕替代量升高而显著降低(P<0.05)。以上结果表明:豆粕替代鱼粉可能通过降低花鲈肠道消化酶活力和表观消化率,从而降低其生长性能,影响其体组成。
  2.豆粕替代鱼粉对花鲈肠道组织形态和肠道机械屏障功能的影响
  肠道形态学测量显示:随着豆粕替代量的逐渐升高,花鲈前肠、中肠绒毛长度、绒毛宽度、肌层厚度和绒腺比逐渐降低。肠道组织结构观察发现:与D1组相比,D2组和D3组的肠黏膜结构遭到破坏,出现肠黏膜上皮细胞逐渐稀疏、排列紊乱、固有层加宽等现象。豆粕的替代水平的增加显著升高了花鲈血清D-乳酸浓度(P<0.05)。当替代鱼粉比例为50%时,花鲈血清二胺氧化酶活性与全鱼粉组相比没有显著性变化(P>0.05),当替代量达到75%时,血清二胺氧化酶活性显著升高(DAO)(P<0.05)。以上结果表明:豆粕替代鱼粉会损伤花鲈肠黏膜组织结构,破坏其机械屏障功能。
  3.豆粕替代鱼粉对花鲈肠道小肽、氨基酸转运载体及炎性因子基因表达量的影响
  与D1组相比,D2和D3组花鲈前肠肽转运载体PepT1基因的表达量显著上升(P<0.05),而中肠PepT1表达量没有显著差异(P>0.05);花鲈前肠氨基酸转运载体(LAT1)表达量在D1和D2组差异不显著(P>0.05),但显著低于D3组(P<0.05),氨基酸转运载体(SLC1A5)表达量在D1和D3组差异不显著(P>0.05),但显著低于D2组(P<0.05);中肠LAT1和SLC1A5表达量随着豆粕替代水平的增加而显著上升(P<0.05)。与全鱼粉组相比,饲料中豆粕替代鱼粉显著增加花鲈前肠促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-2和IL-8基因的表达量(P<0.05);也显著增加中肠TNF-α、IL-1β和IL-2表达量,但对IL-8基因表达量无显著影响(P>0.05)。饲料中豆粕替代鱼粉显著降低花鲈前肠和中肠抗炎因子IL-4基因表达量(P<0.05)。然而,抗炎因子IL-10基因表达量在前肠D2组最高,而在中肠则D3组最高(P<0.05)。以上结果表明,豆粕替代鱼粉会影响花鲈肠道小肽和氨基酸转运载体的表达;高比例豆粕替代鱼粉会增加肠道促炎因子的表达,降低抗炎因子的表达,且前肠的敏感性高于中肠。
  4.豆粕替代鱼粉对花鲈肠道菌群结构的影响
  肠壁微生物多样性测序结果如下:豆粕替代鱼粉水平没有改变花鲈前肠肠壁菌群的种类多样性,但很大程度影响了其肠壁菌群的数量。豆粕替代鱼粉水平没有改变花鲈前肠肠壁的优势菌群种类组成,却很大程度改变了优势菌群菌落的数量组成。且随着豆粕替代鱼粉水平的逐渐升高,花鲈前肠肠壁的有害菌群(假单胞菌、不动杆菌、乳球菌、肠杆菌)数量提高,有益菌(芽孢杆菌)数量降低。

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