粗叶悬钩子抗肝损伤类活性成分对CCI4损伤大鼠肝细胞的影响

摘要

目的：通过药效学实验跟踪有效成分，筛选粗叶悬钩子抗肝损伤类的活性成分，对有效成分进行初步鉴定，并对有效成分作用机制作初步的探讨。
　　 方法：(1)中药常规提取方法制备粗叶悬钩子分类提取物总生物碱，并进行检测。(2)根据总生物碱内成分极性的不同，分别用乙酸乙酯、正丁醇、氯仿等溶剂萃取其不同极性部位。(3)制备小鼠急性肝损伤模型，并用不同极性部位进行干预，观察效果，选取有效极性部位。(4)通过传统柱层析的方法，进一步分离有效极性部位，并合并极性相同或相近的馏分。(5)通过制备色谱法和高效液相色谱法，进一步分离成分。(6)培养大鼠肝细胞，并制备肝细胞损伤模型，通过药物干预模型，观察相关指标的变化，最终选取粗叶悬钩子抗肝损伤的有效成分。
　　 结果：(1)粗叶悬钩子抗肝损伤有效成分-129⑨的不同药物浓度均可不同程度地降低肝细胞培养上清液中ALT、AST的含量；(2)129③的不同药物浓度能不同程度地升高肝细胞培养上清液中SOD的活性，同时降低MDA的含量：(3)129③的不同药物浓度能不同程度地促进肝细胞的增殖；(4)129③能不同程度地调节细胞生长周期，促使细胞向S期转化；(5)129③能显著下调CCl4损伤的大鼠肝细胞中Caspase-3mRNA的表达，并且上调PCNAmRNA的表达。
　　 结论：(1)129③是粗叶悬钩子中抗肝损伤的有效活性成分：(2)129⑨能保护肝细胞膜，减轻肝细胞受损的程度：(3)129③能抑制自由基的生成和脂质过氧化产物的生成，提高肝细胞的抗氧化能力；(4)129③促进肝细胞地增殖，抑制细胞凋亡；(5)129③能够调节细胞生长周期。