多粘类芽孢杆菌WY110的鉴定，固氮酶nif基因定位和培养基优化及常见植物根际促生细菌16S rDNA寡核苷酸芯片的研制

摘要

核酸二级数据库是生物信息学研究的重要领域,对生命科学的研究和发展起重要作用.目前,国际核酸序列公共数据库中存在大量的细菌16S rDNA序列,该研究从国际核酸数据库中收集了所有已知细菌的16S rDNA序列,根据这些序列设计了大约200种细菌的种特异性的16S rDNA寡核苷酸探针,将结果存入数据库,开发基于WEB的查询系统,查询结果形象直观,为设计细菌的种特异性寡核苷酸探针提供参考和帮助.在植物根际存在大量的促生细菌,对这些细菌进行快速的分类地位检测对研究植物与微生物的相互作用和微生物接种剂应用的有效性有重要意义.该研究选择植物根际常见促生细菌,即巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)、生脂固氮螺菌(Azospirillum lipoferum)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)、巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)、短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)、球形芽孢杆菌(Bacillus sphaericus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)、多粘类芽孢杆菌(paenibacilluspolymyxa)、唐菖蒲假单孢菌(Burkholderia gladioli),土壤杆菌属(Agrobacterium)、产碱菌属(Alcaligenes)、节杆菌属(Arthrobacter)、慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)、伯克霍尔德氏菌(Burkholderia)、黄杆菌属(Flavobacterium)、假单孢菌属(Pseudomonas)、根瘤菌属(Rhizobium)、链霉菌属(Streptomyces)和科肠杆菌科(Enterobacteriaceae),分别设计这些不同分类水平(种、属、科)细菌的探针,将其固定在特殊处理的载玻片上,用相关的细菌对这些探针进行筛选,选择特异性较好的探针,将用于对未知样品进行检测.结果表明大部分探针都有较好的杂交信号.

目录

第一部分常见植物根际促生细菌16S rDNA寡核苷酸芯片的研制

摘要

Abstract

第一章综述

第二章细菌种特异性的16S rDNA寡核苷酸探针数据库的初步构建

1前言

2材料和方法

3结果

4讨论

第三章 植物根际常见促生细菌PGPR 16S rDNA寡核苷酸基因芯片的研制

1前言

2材料和方法

3结果

4讨论

5进一步研究的设想

参考文献

第二部分 多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)WY110的鉴定、固氮酶nif基因的定位及培养基的优化

摘要

Abstract

第一章综述

第二章多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)WY110的分子鉴定

1前言

2材料与方法

3结果

4讨论

第三章多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)WY110固氮酶（nif）基因的定位研究

1前言

2材料与方法

3斑点杂交

4免疫检测

5结果

6讨论

第四章多粘类芽孢杆菌(Paenibacillus polymyxa)WY110的培养基条件研究

1前言

2材料与方法

3结果及讨论

4结论

参考文献

蔡正求在攻读硕士学位期间的获奖情况

致谢

附录