三种锦鸡儿属植物的遗传多样性研究

摘要

本研究以自我国内蒙古、山西、陕西和宁夏等地采集的柠条锦鸡儿17份、中间锦鸡儿12份和小叶锦鸡儿5份为供试材料，应用形态多样性分析和ISSR(简单重复序列间隔区)分子标记研究探讨了柠条锦鸡儿、中间锦鸡儿和小叶锦鸡儿三个物种的遗传多样性和亲缘关系。初步研究结果如下：1.经度和海拔等地理生态因子对表型性状有显著的影响；三个物种的表型差异是遗传因素和自然选择的共同作用的结果。2.三个物种的形态多样性比较丰富；荚果长、荚果宽、种子长、种子宽和千粒重等这些性状是造成这三个物种的表型差异的主要因素。3.建立了锦鸡儿属ISSR分析的技术体系：10μL的反应体系中，含10ngDNA、2.0mmol/LMgCl2、150μmol/LdNTP、200nmol/L引物和0.5UTaq酶。反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性45s，52℃退火45s，72℃延伸90s，40个循环；72℃充分延伸7min；4℃24h。4.在供试材料中筛选到具有多态性的ISSR引物19个，共扩增出多态性带154条，多态性条带比率为87.0％；三个物种分子水平的遗传多样性比较丰富。5.根据形态多样性分析和ISSR分子标记的结果，柠条锦鸡儿、中间锦鸡儿和小叶锦鸡儿种间差异不大，亲缘关系较近，难以被明确区分开；但是，又不能充分证明3个物种在分类学上是1个种。因此，关于3个物种在分类学上的地位，还有待于继续深入研究。

目录

论文说明：缩略词

摘 要

第一章前言

一、锦鸡儿属的起源与研究进展

1种属及物种起源

2经典分类学研究

3解剖学研究

4花粉研究

5细胞学研究

6数量分类研究

7遗传标记研究

二、遗传多样性的概念及研究方法

1遗传多样性的概念

2遗传多样性的研究方法

三、形态标记应用

1形态标记简介

2形态标记应用

四、ISSR技术应用

1 ISSR技术简介

2 ISSR技术应用

五、研究目的和意义

第二章三种锦鸡儿属植物的形态多样性分析

一、材料与方法

1材料

2形态特征的测量与记录

3数据处理

二、结果与分析

1形态特征及单因子方差分析F-检验

2聚类分析

3主成分分析

4回归分析和相关分析

第三章三种锦鸡儿属植物的ISSR遗传多样性分析

一、材料与方法

1植物材料

2 ISSR引物

3基因组DNA的提取

4 ISSR实验程序

二、结果与分析

1反应条件的优化

2引物筛选

3遗传多样性分析

第四章讨论

一、三种锦鸡儿属植物的形态多样性

二、锦鸡儿属植物基因组DNA的提取

三、ISSR技术体系的建立

四、三种锦鸡儿属植物分子水平的遗传多样性

五、基于形态多样性分析与ISSR标记的方法揭示的三种锦鸡儿属植物遗传多样性比较

六、柠条锦鸡儿、中间锦鸡儿和小叶锦鸡儿的分类地位

第五章结论与展望

参考文献

在读期间论文完成和发表情况

致谢

附录一：ISSR引物序列

附表二：电泳试剂配方