有机阴离子转运多肽1B1遗传多态性对普伐他汀药代动力学的影响

摘要

普伐他汀为3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂，临床常用于高胆固醇血症的治疗。普伐他汀需有机阴离子转运多肽181(OATP1B1，编码基因为SLCO181)的介导进入肝细胞发挥其对胆固醇合成的抑制作用，且主要通过肝脏进行消除，由OATP1B1介导的肝脏对普伐他汀的摄取过程是其通过肝脏进行消除的限速步骤，因此，使OATP1B1转运能力发生改变的因素可能对普伐他汀的药代动力学及药效动力学产生影响。 OATP1B1特异性表达于人肝细胞基底外侧膜上，对肝细胞从门静脉摄取内源性物质和药物起关键作用。遗传学研究结果表明，OATP1B1具有遗传多态性，且其中一些等位基因，如SLCO1B1*15会使其转运功能显著降低。国外一些文献报道了OATP1B1遗传多态性对普伐他汀药代动力学的影响，国内尚无相关研究，因此本研究对汉族人OATP1B1的遗传多态性进行了考察，并初步研究了汉族人OATP1B1遗传多态性对普伐他汀药代动力学的影响。 本研究首先建立了人血浆中普伐他汀的HPLC测定法，结果表明，该方法特异灵敏、准确精密，满足药代动力学研究需要。同时建立了多聚酶链反应-限制性片段长多态分析(PCR-RFLP)和等位基因特异-多聚酶链反应(AS-PCR)等方法，对报道较多的OATP1B1的单体型SLCO181*1a、SLCO181*1b、SLCO181*5及SLCO181*15进行了检测。 在此基础上，本研究对180名无亲缘关系的汉族健康受试者(男137名，女43名)的OATP1B1遗传多态性进行了分析。结果表明，等位基因388A、388G、521T及521C的发生频率分别为0.294、0.706、0.908及0.092；单体型SLC0181*1a、SLCO181*1b及SLCO181*15的发生频率分别为0.294、0.614及0.092，未发现单体型SLC0181*5。基因型SLCO181*1a/*1a、SLCO181*1b/*1b、SLCO181*1a/*1b、SLCO181*1a/*15、SLCO181*1b/*15及SLCO181*15/*15的发生频率分别为0.078、0.372、0.372、0.061、0.111及0.006。在本研究考察的汉族人群中，单体型SLCO1B1*1b的发生频率最高，SLCO1B1*15的出现频率较高，且发现了1名SLCO1B1*15纯合子受试者。同时考察了OATP1B1遗传多态性对普伐他汀药代动力学的影响。18名自愿参加且基因型为SLCO1B1*1b/*1b、SLCO1B1*1a/*15、SLCO1B1*1b/*15或SLCO1B1*15/*15的健康受试者入组了此项研究。研究中，按基因型将受试者分为三组，即*1b纯合子组(n=9，男性7名，女性2名)、*15杂合子组(n=8，男性5名，女性3名)和*15纯合子组(n=1，男性)。在受试者服用40mg普伐他汀前(Oh)及服药后0.33h、0.67h、1h、1.5h、2h、3h、4h、5h、6h、8h抽取前臂静脉血4ml，采用HPLC-UV法测定血浆中普伐他汀的浓度，计算每组受试者的药代动力学参数，对*1b纯合子组及*15杂合子组的药代动力学参数进行Mann-Whitney U检验。结果表明，*1b纯合子组受试者和*15杂合子组受试者的C<,max>分别为116.06±46.22ng·mL<'-1>和173.36±36.23ng·mL<'-1>，具有显著性差异(p=0.011<0.05)；未发现两组间其他药代动力学参数，如AUC<,0-8h>(p=0.093>0.05)、AUC<,0-∞>(p=0.370>0.05)、T<,max>(p=0.139>0.05)、t<,1/2>(p=0.093>0.05)及CL/F(p=0.114>0.05)的显著性差异。值得关注的是，SLCO181*15纯合子受试者的C<,max>和AUC<,0-8h>分别为401.76ng·mL<'-1>和660.05h·ng·mL<'-1>，明显高于其他两组受试者，其C<,max>分别为*1b纯合子组和*15杂合子组受试者的3.46倍和2.32倍，其AUC<,0-8h>分别为*1b纯合子组及*15杂合子组受试者的2.67倍及2.09倍。还发现*15杂合子组受试者的CL/F(126.96±24.68L·h<'-1>)比*1b纯合子组受试者的CL/F(168.12±53.20L·h<'-1>)低41.16L·h<'-1>，SLCO1B1*15纯合子受试者的CL/F(59.60L·h<'-1>)在所有受试者中最低，分别为*1b纯合子组和*15杂合子组受试者的35.45％和46.94％。 综合上述结果，本研究得出的初步结论是：①在汉族人群中，OATP1B1存在遗传多态性，单体型SLCO1B1*1b的发生频率最高(频率为0.614)，SLCO1B1*15的发生频率较高(频率为0.092)；②OATP1B1遗传多态性会对普伐他汀的药代动力学产生影响，携带SLCO1B1*15的受试者服用普伐他汀后血药浓度显著偏高，这一现象在SLCO1B1*15纯合子受试者中表现得尤为明显。 虽然SLCO1B1*15纯合子在汉族人群中出现的频率不高(1/180)，但基于其对普伐他汀药代动力学影响的显著性，进一步对SLCO1B1*15纯合子患者的药代动力学及药效动力学进行考察具有潜在的临床意义。

目录

论文说明:英文缩略词

前言

第一部分人血浆中普伐他汀HPLC测定法

第二部分汉族人有机阴离子转运多肽1B1遗传多态性分析

第三部分OATP1B1遗传多态性对普伐他汀药代动力学的影响

全文总结

综述一有机阴离子转运多肽1B1(OATP1B1)的研究进展

综述二siRNA用于基因治疗的研究进展

致谢