猪圆环病毒2型Cap蛋白ELISA检测方法的建立及初步应用

摘要

将杆状病毒表达系统表达并经梯度离心纯化的PCV2 Cap蛋白作为标准品，利用双抗夹心法建立了针对猪圆环病毒2型抗原的检测方法，并应用于圆环病毒2型基因工程疫苗的质控。结果表明，多抗最适包被浓度为lμg/ml，最佳封闭液为1％BSA，最佳单抗反应浓度为2μg/ml，反应时间60min，最佳二抗使用稀释度为1：40000，反应时间为60min。该方法与Sf9细胞、BSA和其它猪病病毒抗原之间无交叉反应，最低检测抗原量为5ng。