PRRSV新的结构蛋白ORF5A的蛋白质组学分析

摘要

为了解PRRS病毒复制过程中OR5a蛋白的生物学功能，研究了此蛋白调控的自然靶细胞基因表达补偿改变。首先，使用逆转录病毒介导的基因传递系统，将PRRSV ORF5a基因(带有His标签)稳定转移至PAM-pCD163细胞。其次，选取能够稳定持续最高水平表达ORF5a蛋白的PAM细胞系。提取不同程度的细胞蛋白，使用蛋白质组学方法，联合二维电泳(2-DE)和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)方法进行分析。选取平均点密度在统计学显著和差异在正负2倍的蛋白点，进行MS分析，并在NCBI数据库中进行查找。实验结果表明：36个蛋白点在PAM-pCD163-ORF5a细胞中的表达与正常PAM-pCD 163细胞表达有差异。