东亚飞蝗Diptericin基因的克隆与表达分析

摘要

双翅肽(Diptericin)是抗菌肽家族中的一员,在昆虫先天免疫系统中起着重要作用.本研究通过分析东亚飞蝗(Locusta migratoria manilensis(Meyen))转录组数据库,获得东亚飞蝗双翅肽基因的cDNA序列,命名为LmDpt.LmDpt全长394bp,包含一个282bp的完整开放阅读框,编码93个氨基酸,理论分子量为9.97 kDa.氨基酸序列的N端有一个信号肽,C端有一个富含甘氨酸的G结构域.同源性分析表明LmDpt与长红猎蝽Rhodnius prolixus的Diptericin相似性最高.进化关系分析表明,LmDpot属于Attain_C超家族,与长红猎蝽Diptericin的亲缘关系最近.基因定量分析显示,大肠杆菌刺激后2h,LmDpt的表达出现明显上调,至8h表达量达到最高,随后LmDpt表达开始缓慢下降,直到72h还保持较高的表达水平.研究结果显示LmDpt基因在大肠杆菌侵染后,迅速表达,且能持续较长时间的高水平表达,说明LmDpt基因在东亚飞蝗的免疫防御过程中起着重要作用.