三种典型荒漠灌木内生固氮菌及固氮酶基因nifH多样性分析

摘要

本研究以多枝怪柳、黑果构祀、盐穗木为材料，从根、茎组织中分离、固氮酶活性测定，筛选获得137个内生固氮菌菌株。对分离固氮菌株进行16SrDNA、固氮基因nif H PCR扩增、序列测定和PCR-RFLP多态性分析，解析其遗传多样性及系统发育关系。结果显示，根据16SrDNA PCR- RFLP酶切图谱，将137个分离菌株聚类为9个类群，选取每个类群代表菌株的16SrDNA PCR产物进行序列测定和系统发育分析，菌株分属于拉恩氏菌属(Rahnella sp) ,假单胞菌属(Pseudomonas sp)、泛菌属(Pantoea sp)、芽抱杆菌属((Bacillus sp)和寡养单胞菌属(stenotrophomonas sp)，申氏杆菌属(Shinella sp)，其中拉恩氏菌属为优势菌属。分离菌株固氮酶基因nif H PCR-RFLP基因图谱中分为三个基因型，具有一定的遗传多样性特征。本研究首次对多枝怪柳、黑果构祀、盐穗木内生固氮菌及固氮酶基因nif H多样性及其系统发育进行研究，对于丰富固氮微生物物种资源库和基因库，固氮菌资源的保护和利用具有重要的作用。