釉基质蛋白对人牙髓细胞成牙本质分化的影响

摘要

目的：探讨釉基质蛋白对人牙髓细胞(HDPC)成牙本质分化的影响,为牙本质的组织工程学研究提供有效的生物活性物质.方法：将HDPC接种于6孔板(2×105个/L)后分为5组,分别加入含1、10、100mg/L釉基质蛋白(EMP)、10-8mol/L地塞米松及100mg/L抗坏血酸(Dex-AA组)、单纯基础培养液(对照组).于培养1、5、10 d分别用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ALP活性,实时荧光定量反转录聚合酶链反应技术检测成牙本质相关基因牙本质基质蛋白1(DMP-1)及牙本质涎磷蛋白(DSPP)的表达,用茜素红染色检测并定量分析矿化情况.结果：各组ALP水平呈时间依赖性上调,培养1d后各组ALP活性与对照组相比差异均无统计学意义;5d后EMP 10、100mg/L组及Dex-AA组ALP活性显著增高,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05);10d后10mg/L EMP组及Dex-AA组ALP活性增高更显著,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.01).培养ld后各组DMP-1及DSPP mRNA水平均较对照组显著升高,差异均有统计学意义(P＜0.01);培养10d后10mg/L EMP组DMP-1和DSPP表达水平均显著增高.培养10d后各组均有矿化,10mg/L EMP组钙离子浓度显著高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01).结论：适当浓度的EMP对HDPC的成牙本质分化有一定的促进作用.