检测马冠状病毒抗体的ELISA试剂盒研制

摘要

将重组杆状病毒rBac-ECV-N感染Sf9昆虫细胞,以表达出的ECV-N蛋白作为抗原,以酶标记的鼠抗马IgG特异性单抗为二抗,组建检测马冠状病毒抗体的ELISA试剂盒。研究结果表明,ECV-N蛋白最佳包被浓度为10μg/mL初提重组蛋白,马血清以1:100稀释,酶标记的抗马IgG单克隆抗体工作浓度1:5000可以鉴别出阳性抗马冠状病毒血清抗体。利用该方法对来自三个国家的1064份马血清进行了检测,结果国内711份马血清中检测出14份阳性;澳大利亚335份马血清中检测出31份阳性;瑞典18份马血清中没有检测到阳性。马冠状病毒血清抗体间接ELISA检测试剂盒的研制成功,为马的传染性疾病的预防和控制提供了一种更为安全可靠的途径。

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