参芪扶正注射液对放射性脑损伤防护机制的研究

摘要

目的：研究参芪扶正注射液对于放疗引起的脑损伤的作用及其保护的分子机制. 方法：将6～8周龄C57BL/6J小鼠随机分成四组：①空白对照组(Control);②单纯照射组(RT)：全脑放疗20Gy;③放疗前四周治疗组(B4RT)：参芪扶正注射液(20ml/ml/d)治疗四周后全脑20Gy放疗;④放疗前两周治疗组(B2RT)：参芪扶正治疗两周后接受全脑20Gy放疗后再予以参芪扶正治疗两周治疗.观察急性放射性脑损伤后小鼠体重毛发颜色变化；水迷宫检测参芪扶正对放射性脑损伤后小鼠认知功能的影响；采用伊文思蓝检测各组各组血脑屏障的变化，电镜观察伊文思蓝通透性最大时血脑屏障的改变；Real-time PCR检测急性脑损伤后不同时间点炎性因子TNF-α、IL-1β表达水平；Iba-1与F4/80双重免疫荧光检测急性放射性脑损伤后海马区小胶质细胞的的表达水平；Western blot检测各组细胞核转录因子NF-KB核转录因蛋白p65表达水平。 结果：放疗后8w小鼠头部放疗区域有少许毛发颜色变白并伴有脱落，而参芪扶正治疗组小鼠毛发颜色变白与脱落的情况较轻；放射性脑损伤后小鼠体重有不同程度的减轻，在72h与1w时有统计学意义(t=6.325，t=3.326，P<0.05)；放疗后小鼠血脑屏障通透性增大，而参芪扶正治疗后降低血脑屏障的通透性；单纯放疗组小鼠逃避潜伏期为(52.8±10.4s)较对照组(32.5±9.6s)明显延长（t=9.635，P<0.05），而放疗前四周与放疗前两周参芪扶正治疗组小鼠逃避潜伏期分别为(45.8±10.2s)与(42.1±12.4s)，与放疗组比较时间缩短，但差异无统计学意义；Iba-1与F4/80双重免疫荧光显示放射性脑损伤后小鼠海马区静止状态的细胞有不同程度的激活其明显高于对照组，而放疗前四周与放疗前两周参芪扶正治疗组能够显著降低海马区小胶质细胞的激活；Western显示参芪扶正注射液可以显著抑制NF-KB的磷酸化水平。 结论：参芪扶正可能通过抑制NF-KB的活化，抑制放疗后小胶质细胞的激活，从而下调炎性因子的表达，从而保护放射性脑损伤。