基于nano LC-MS/MS的水牛角水提液解热活性部位多肽组研究

摘要

水牛角在中医临床用于治疗热证已经有千年历史,然而,水牛角物质基础仍不明确,尤其是源于蛋白质降解碎片的肽类成分.本文研究了水牛角解热活性部位(WBHF),结果表明,WBHF能显著降低大鼠体温,降低血浆中白介素1β(IL-1β),肿瘤坏死因子(TNF-α)前列腺素E2(PGE2),及环腺苷单磷酸(cAMP)的水平.进一步,以nano LC-MS/MS研究分析了WBHF中多肽的组成,共测定了824个多肽的序列,主要来源于水牛角角蛋白,其中许多肽类物质为水牛角在水煎煮过程中蛋白质的非特异性降解产物.水牛角多肽的heatmap分析结果表明,角蛋白14(KRT 14),角蛋白34(KRT 34)及角蛋白86(KRT 86)代表了水牛角角蛋白的主要的水解类型.在鉴定的肽段中,81.2％为亲水性的,70.3％的多肽分子量小于2000Da.基于本文的研究,以nano LC-MS/MS研究角类动物药水煎煮液中混合多肽组成是可行的.