同时分离和培养兔骨髓来源的EPCs和SPCs

摘要

目的:同时分离和培养兔骨髓来源的内皮祖细胞(EPCs)和平滑肌祖细胞(SPCs),研究其生物学特性,评估其作为组织工程化静脉瓣种子细胞的可能性.rn 方法:密度梯度离心法获取骨髓血单个核细胞,分别用两种培养基向EPC和SPC方向诱导培养;分别观察两类细胞的形态特征与超微细胞结构,检测表面标志物的表达情况;检测细胞摄脂及成血管功能.rn 结果:EPCs培养10天呈“铺路石”状;透射电镜可见胞浆内特征性W-P小体;表达CD34,VEGFR-2，弱表达CD133;具有摄取DiI-ac-LDL和结合FITC-UEA-1的功能，在Matrigel上呈现血管状。SPCs培养14天左右呈“峰-谷”样生长;透射电镜下可见肌丝;表达CD34,SMA，不表达U10和VEGF-2;无摄脂及成血管功能。rn 结论:兔骨髓来源的单个核细胞，可同时诱导培养获得EPCs和SPCs，可作为构建组织工程化静脉瓣的种子细胞。该方法省时、经济。