家兔骨髓基质细胞的分离培养与成骨活性评价

摘要

目的:骨髓基质细胞是骨髓中存在的一种具有多向分化潜能的多能干细胞,在特定培养条件下,可以分化为成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞及成肌细胞等.本实验通过对家兔骨髓基质细胞体外分离培养、增殖活力与成骨活性检测,探讨骨髓基质细胞体外分离培养条件与生长特征,为其用于骨缺损组织工程修复的研究奠定基础.rn 方法:利用全骨髓贴壁培养法分离培养新生兔骨髓基质细胞;通过台盼兰染色和细胞形态观察判定骨髓基质细胞的性状与增殖活力;对骨髓基质细胞进行体外钙化诱导培养,通过钙化结节Von Kossa染色,检测骨髓基质细胞的成骨活性.rn 结果:全骨髓贴壁培养法分离培养的骨髓基质细胞为不规则星形、多角形，呈条索装、团块状贴壁生长，细胞性状较为稳定，生长旺盛，分离培养后第3天即开始进入快速增长期，平均细胞倍增时间约为3.4天。Von Kossa染色显示，经钙化诱导培养三周后，有较多明显的低透光度钙化结节形成;未进行钙化诱导的骨髓基质细胞中亦存在少量体积较小的钙化结节，说明骨髓基质细胞具有诱导分化成骨的特性。rn 结论:新生家兔全骨髓贴壁培养法可获取数量充足的、增殖活力与成骨分化活性较好的骨髓基质细胞，拟作为种子细胞用于后续的领骨缺损组织工程修复方法研究。