呼吸道合胞病毒(RSV)两个非结构蛋白NS1和NS2被通过阻断酪氨酸蛋白激酶/信号传导与转录活化因子(JAK/STAT)通路,细胞因子信号转导抑制因子(SOCS)基因家族可以通过其负反馈机制阻断JAK/STAT信号通路激活继而抑制干扰素的生成.本研究构建表达质粒NS1转染至A549细胞后观察其对上皮细胞内SOCS基因的调节作用.构建稳定的RSV-NS1(富含GC)表达质粒;(1)在建立瞬时表达细胞基础上,应用real time PCR的方法检测NS1转染A549细胞RIG-I,TLR3受体及SOCS1/3 mRNA的表达水平;(2)先以siRNA-NS1(si-NS1)转染A549细胞24h后,再分别感染RSV4h后检测SOCS1mRNA的表达水平;(3) western blot的方法检测NS1转染A549细胞0,1,2,4,8h后STAT2的蛋白及其磷酸化的表达水平;(4)先以siRNA-SOCS1(si-SOCS1)转染A549细胞24h后,western-blot的方法检测NS1表达细胞STAT2的蛋白及其磷酸化表达水平.经研究后得出：RSV NS1不依赖RIG-I, TLR3信号通路直接上调SOCS1的表达从而抑制STAT2及其磷酸化的表达。
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