EV71感染小鼠脑组织MMP-9、MMP-2的表达与血脑屏障损伤的相关研究

摘要

目的:通过制作EV71感染模型,观察EV71感染后小鼠的生存情况,检测不同时间点、脑干及大脑组织MMP-9、MMP-2的分泌水平,脑组织含水量及电镜观察脑神经毛细血管形态、结构变化情况,探讨EV71感染小鼠脑组织MMP-9、MMP-2的表达与血脑屏障损伤的关系,探讨EV71感染后是否更易累及脑干组织.方法:小鼠腹腔注射肠道病毒71型(EV71)制造EV71病毒性脑炎模型,于感染后1、3、5、7、10、14天,分别取小鼠大脑及脑干组织,应用qRT-PCR分别检测MMP-9mRNA、MMP-2mRNA的表达情况,利用Elisa方法检测MMP-9及MMP-2蛋白表达情况,通过透射显微镜检测大脑及脑干脑毛细血管结构变化以及脑组织含水量了解血脑屏障损伤情况.结果:1.小鼠生存状况:EV71感染后小鼠第1天即开始发病,于感染后3-5天症状达高峰,表现为肢体活动不灵、消瘦、肢体麻痹、耸毛、低反应性、死亡.10天后症状逐渐缓解,存活小鼠体重较正常小鼠减轻.EV71感染小鼠共60只,其中17只出现肢体麻痹,7只小鼠死亡.2.EV71感染第1、3天脑干组与同时间点EV71感染大脑组比较,MMP-9mRNA表达量及其蛋白浓度显著增加(P＜0.01).3.EV71感染后第1、3天,EV71脑干组MMP-2mRNA表达量及其蛋白浓度显著高于EV71大脑组(P＜0.05).4.EV71感染后第1、3天脑干含水量较大脑含水量显著增加(P＜0.001).结论:1. EV71病毒性脑炎呈急性经过，感染极期脑干组织血脑屏障更易受损;2.EV71感染极期MMP-9, MMP-2的表达量增高与血脑屏障损害及脑水肿程度呈正相关;3.MMP-9, MMP-2参与了EV71病毒性脑炎血脑屏障损伤的病理生理过程;4.MMP-2可能在EV71病毒性脑炎早期的血脑屏障损害的病理生理过程起到更重要作用;MMP-9的表达量与血脑屏障损伤及脑组织水肿程度直接相关;5.临床上可考虑检测MMP-9, MMP-2水平来判断血脑屏障损害程度、评价预后。