OX40-CCL20在介导OVA诱导的气道炎症中的作用研究

摘要

目的:探讨OX40-CCL20在介导OVA诱导的气道炎症中的作用.方法:体外培养DO11.10小鼠脾细胞,经OVA-323-339肽段刺激后测定T细胞表面OX40表达,并予不同剂量OX40激活抗体干预,在不同时间点采用Westenblot技术测定CCL20蛋白含量.在此基础上予NF-κB,JNK及MEK抑制剂干预,Westenblot测定抑制不同信号传导途径后对OX40诱导CCL-20表达的影响;建立OVA诱导的抗原特异性气道炎症模型,将体外OX40激活抗体干预及未干预的脾细胞匀浆经鼻导入肺部,部分小鼠予CCL20中和抗体干预,观察不同干预组气道炎症的影响.结果:静息状态下DO11.10小鼠脾细胞低水平表达OX40,经OVA-323-339肽段刺激后T细胞活化,细胞表面OX40表达显著增强;经OX40激活抗体干预后,脾细胞中CCL20表达呈剂量依赖型增强.NF-κB,JNK及MEK抑制剂干预后显著抑制OX40诱导的CCL20表达,并显著抑制OX40诱导的IL-17A分泌;在OVA诱导的气道炎症中,经气道给予OX40激活抗体干预的脾细胞匀浆后气道炎症显著增强,在次基础上同时给予CCL20中和抗体后则显著减轻气道炎症.结论:OX40作为重要的共刺激分子不仅可通过其配体OX40L参与T细胞与APC细胞间的相互活化，而且本研究证实激活T细胞表面OX40可促进T细胞分泌趋化因子CCL20，通过趋化相应免疫细胞参与特异性抗原诱导的气道炎症，其内在信号传导通路可能涉及NF-κB. JNK和MEK.