猪精液冷冻保存技术的优化实验研究

摘要

通过对猪精液的冷冻稀释液、甘油浓度、精子密度、冷冻及解冻方法等各个方面的研究，从精子活力、质膜完整率、顶体完整率和畸形率等方面检查精子质量，以期筛选并制定出一套简便，实用、效果稳定的猪精液冷冻方法。结果表明：猪精液在17°C常温保存稀释液中保存3天后，ZO液中精子活力为：0.67，精子畸形率为7.25％，均优于其他三组，但差异不显著(p>0.05)。在冷冻液方面，3号液冷冻保存的精液，解冻后精子活力显著高于1号液，2号液和4号液，差异显著(P<0.05)。解冻后3号液的精子质膜完整率高于其它三组，但差异不显著(P>0.05)，顶体完整率也高于其它三组，与2号液和4号液存在显著性差异(P<0.05)。解冻方法上，用37°C30s方法解冻，精子活力，质膜完整率显著高于其它三组，顶体完整率也高于其它三组，但差异不显著(p>0.05)。畸形率最低与60°C30s组差异明显，(P<0.05)。在精子密度和平衡时间上，0.5 × 109个／mL猪精子冷冻解冻后，精子活力、质膜完整率和顶体完整率均显著高于密度为0.7 × 109个／mL、1×109个／mL两组(P<0.05)。畸形率与其它三组无显著差异(P>0.05).平衡2h组在精子活力和顶体完整率上明显高于平衡0.5h、1h和3h组(P<0.05)，畸形率和质膜完整率较其它三组无显著差异(p>0.05)。冷冻保护剂方面，采用5％甘油浓度冷冻效果优于乙二醇和DMSO。采用此方法冷冻的皮特兰公猪精液给10头母猪输精后8头在两个情期未返情。