基于细胞砖技术的可注射性颅面软骨移植体的构建

摘要

目的:肿瘤术后的颅面软骨缺损的整复是外科面临的重要难题,本研究旨在构建一种可注射性的微创软骨修复技术,并且使得软骨移植体具有良好的三维形态维持性.我们采用颗粒化的软骨细胞聚集体作为构建单元,以自体血小板血浆作为凝胶基质,探讨一种最佳的软骨细胞移植策略.rn 方法:将兔耳软骨细胞酶解消化后,接种于细胞培养皿中,进行高密度的细胞培养,10天后,将获得的细胞膜片进行颗粒化,此外一部分获取的软骨细胞进行二维扩增.将15只免疫缺陷小鼠随即分为三组:细胞-PRP组;细胞砖-PRP组;细胞砖-细胞-PRP组.将获取的细胞、细胞砖分别或者一起共混于PRP中，在凝血酶作用下，注射于裸鼠背部皮下。rn 结果:8周后，所有的移植物转化成白色弹性的软骨样组织。然而，不同组的形成组织在形态上明显不同。细胞砖一PRP组;细胞砖一细胞一PRP组再生出的软骨组织具有良好的外形，然而细胞一PRP组再生组织明显变形扭曲。组织学上，所有的实验组表现出了软骨陷窝样的结构，蛋白多糖富集以及二型胶原免疫染色阳性的组织基质。但是，细胞砖一PRP组表现出了巢穴状的组织结构，软骨结构中含有大量的不规则的间隙，其中可见尚未降解的血小板组织。进一步，细胞砖一细胞一PRP组则表现出了均匀形成了软骨组织，以及最高的基质-细胞比例。胶原、蛋白多糖检测证实细胞砖一细胞一PRP组再生的软骨组织具有最佳的胶原以及蛋白多糖含量，软骨蛋白基因表达以及随后的力学测试均证实细胞砖一细胞一PRP组再生的软骨组织具有最佳的软骨组织形成质量。rn 结论:细胞砖技术可以彻底解决PRP作为软骨注射基质导致的收缩、变形问题，而其形成为三维微环境容纳软骨细胞后，可以维持扩增的软骨细胞良好的表型，形成具有稳定三维形态以及软骨表型的软骨组织，在颅面软骨形成中具有重要的应用前景。