表达虎源流感病毒HA蛋白重组犬2型腺病毒的构建与鉴定

摘要

将虎源H5N1亚型流感病毒A/Tiger/Harbin/01/2002(简称HAB/01)的HA基因克隆与PVAX1载体中,然后将含有HA基因的表达盒(CMV+HA+PolyA)克隆入pVAX△E3的E3缺失处,获得含有HA表达盒的穿梭载体p△EHA.再用Sal I+Nru I分别对p△EHA和pPoly-2-CAV2进行双酶切,分别进行凝胶电泳回收目的片段,将含有HA表达盒的Sal I+Nru I片段定向克隆入pPoly2-CAV2,获得了在E3区缺失处插入HA表达盒的重组CAV-2基因组载体pCAV-2/HA.释放CAV-2/HA重组基因组转染DK细胞,获得了重组活病毒CAV2/HA.使用该重组病毒免疫猫表明可以产生针抗H5亚型流感病毒效价为1:8~1:16的血凝抑制抗体.

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