表达TgROP18的转基因新孢子虫的构建

摘要

本研究拟通过表达TgROP18的转染质粒,转入新孢子虫,建立TgROP18转基因新孢子虫,观察、检测转基因新孢子虫的生物学特性,明确表达TgROP18的新孢子虫活性、毒力等生物学功能是否发生变化,为进一步阐明弓形虫与新孢子虫之间毒力差异的分子机制奠定基础.首先在GenBank上调取弓形虫RH株的TgROP18基因序列,利用该序列登陆Sanger网进行Blast,获得新孢子虫中与TgROP18基因序列同源性最高的核苷酸序列,并对TgROP18及NcROP18序列进行比较分析.随后通过Overlap PCR扩增TgROP18,对序列中的EcoRV酶切位点进行同义突变.本研究成功构建了表达TgROP18的转基因新孢子虫,为下一步研究转基因新孢子虫表型特征和弓形虫与新孢子虫毒力差异的分子机制奠定基础.