BQP35是血清学检测莫氏巴贝斯虫临潭株感染的潜在抗原

摘要

本研究应用体外培养单克隆的莫氏巴贝斯虫临潭株G7株,纯化获得裂殖子,提取/纯化RNA和mRNA,构建裂殖子cDNA表达文库.以感染后第6周的羊血清,用免疫学筛选技术,自该cDNA文库中筛选获得5个具有较高相似性的EST片段(297-357bp).然后应用5'RACE扩增技术,扩增获得一个1140bp的基因,同源性分析表明,BQP35与牛巴贝斯虫的一个假定蛋白具有26％的相似性.结果显示,该蛋白是一个IUP蛋白,最长的无序区长105个氨基酸,总的无序区有286个氨基酸,占总蛋白长度的91.96％.最后,应用western blot和ELISA对BQP35作为检测低致病性的莫氏巴贝斯虫感染的抗原潜力进行了评价,结果显示,该抗原与我国羊的其它主要其它梨形虫和羊无浆体的阳性血清没有交叉反应,而只与低致病性的莫氏巴贝斯虫天祝株有一定的交叉反应.在ELISA中,在莫氏巴贝斯虫临潭株感染一周后的羊血清中就可以检测到抗BQP35的抗体.本研究首次在巴贝斯虫中鉴定到IUP蛋白,并对其作为血清学检测抗原的潜力进行了评价.