不同粒径汽车尾气颗粒物对A549细胞TNF-α、IL-6、NF-KB mRNA及NF-KB蛋白水平影响的比较

摘要

目的：探讨并比较不同粒径汽车尾气颗粒物对人肺癌上皮细胞A549炎症相关因子TNF-α、IL-6、编码转录的核因子-κB (NF-κB)基因转录水平以及NF-κB蛋白表达的影响.方法：以分级捕获的汽车尾气颗粒物混悬液(100μg/ml)染毒A549细胞,48h后RT-PCR法检测细胞TNF-α、IL-6及NF-κB (P65)基因表达水平,Western Blot法检测胞浆及核内NF-κB (P65)蛋白表达水平.结果：①与对照组相比,各染毒组细胞TNF-α、IL-6及NF-κB(P65) mRNA表达水平均上升(P＜0.05),从高到低依次为0.56～1.0、0.18～0.32、0.32～0.56、1.0～1.8和1.8～3.2μm组,两两之间(除0.18～0.32和0.32～0.56之间、1.0～1.8和1.8～3.2之间外)差异有统计学意义(P＜0.05).各组TNF-α、IL-6 mRNA水平与NF-κB(P65)mRNA水平显著相关(R=0.944、0.890,P＜0.05).②与对照组相比,除1.8～3.2μm组外,其余各组胞浆NF-κB (P65)蛋白水平均降低(P＜0.05),从高到低依次为1.0～1.8、0.18～0.32、0.32～0.56、0.56～1.0μm组;而胞核NF-κB (P65)蛋白水平均增高(P＜0.05),从低到高依次为1.0～1.8、0.18～0.32、0.32～0.56、0.56～1.0μm组.结论：①不同粒径汽车尾气颗粒物作用于A549细胞后均可使TNF-α、IL-6、NF-κB mRNA表达升高,并诱导活化的NF-κB从细胞质进入细胞核行使其调控炎症反应的功能.②粒径是影响颗粒物毒作用大小的重要因素之一,各染毒组中以0.56～1.0μm组的损伤效应最强,但是当粒径减小至纳米级时却未见炎性损伤进一步加重.