miR-378种子序列突变对其功能的影响

摘要

miRNA是一类在植物、动物、病毒中发现的长度只有22nt,在生物体的生长、发育过程具有重要的调节作用的非编码RNA,且miRNA碱基突变对miRNA的生成以及功能都会产生影响.本试验旨在对miR-378种子序列中单碱基突变对其成熟体的生成及功能的影响进行研究.首先构建了野生型miR-378和突变型miR-378过表达载体进行转染,q-PCR检测野生型miR-378和突变型miR-378表达量情况;并利用生物信息学分析预测野生型miR-378和突变型miR-378的靶基因,结合部分已验证野生型miR-378的靶基因进行荧光素酶验证.试验成功构建了野生型miR-378和突变型miR-378表达载体以及不同靶基因的荧光素酶报告载体;q-PCR结果显示突变型miR-378的表达量显著的高于野生型miR-378的表达量;双荧光素酶报告实验结果显示突变型miR-378的靶基因相比于野生型miR-378出现了靶基因的获得和缺失.