环境雌激素重组酵母测评系统的建立

摘要

目的通过检测重组酵母中报告基因的表达产物来反映环境雌激素通过雌激素受体介导而产生的拟雌激素作用.方法用乙酸锂法将本实验室已构建成功的全长人雌激素受体酵母表达载体pGAD-ADER-hRE和雌激素效应元件(ERE)调控的酵母报告载体pLacZi-2ERE导入酵母细胞中,得到重组酵母YM-ADER-ERE.结果与对照DMSO相比,加入17β-雌二醇(E<,2>后YM-ADER-EREK中报告基因lacZ的表达产物β-半乳糖苷酶活性显著升高.用终浓度为10<'-15～10<'-7>mol/L的E<,2>进行实验,E<,2>在YM-ADER-ERE中最大效应E为94.31U,EC<,50>为0.34nmol/L.结论重组酵母中报告基因的表达是雌激素配体依赖的,符合环境雌激素测评系统的设计思想和要求,初步表明重组酵母测评系统是组醇母中报告基因的表达是雌激素配体依赖的,符合环境雌激素测评系统的设计思想和要求,初步表明重组酵母测评系统是成功的.