蛋白酪氨酸磷酸酶shp-2在乳腺癌细胞移动及粘附中的作用

摘要

目的:探讨SHP-2在乳腺癌细胞MCF-7的移动及粘附中的作用.方法:利用基因重组技术人别将野生型SHP-2与突变型SHP-2与绿色荧光蛋白GFP的基因片段构成重组质粒(SHP-2-GFP、SHP-2C>S-GFP),脂质体转染法分别转入MCF-7中,表达成功后筛选并建立SHP-2-GFP和SHP-2C>S-GFP细胞株.荧光显微镜观察细胞移动情况,免疫印迹法检测粘附分子E-钙粘蛋白和金属蛋白酶MMP-1的表达.结果:成功建立SHP-2-GFP及SHP-2C>S-GFP细胞株,同时观察到SHP-2C>S-GFP细胞的形态发生明显的改变:从梭形状态变成圆形状态.荧光显微镜发现MCF-7细胞和SHP-2-GFP、SHP-2C>S-GFP转染的细胞在3h、6h、9h的移动情况分别是MCF-7为10﹪、23﹪、54﹪,SHP-2-GFP为15﹪、49﹪、98﹪,SHP-2C>S-GFP为4﹪,11﹪、30﹪.免疫印迹结果表明SHP-2>S-GFP细胞的E-钙粘蛋白表达比SHP-2-GFP细胞明显升高(P<0.05).MMP-1的表达量在SHP-2-GFP细胞中有所增强(P<0.05).结论:蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2通过调节粘附分子和基质金属磷酸酶而在细胞移动、粘附以及扩展中发挥重要作用.