狂犬病病毒糖蛋白膜外区重组犬-2型腺病毒构建及免疫研究

摘要

通过RT-PCR扩增得到狂犬病病毒糖蛋白膜外区序列,将该序列克隆入pMD-18T中;用膜外区序列将pEGFP-C1中的绿色荧光蛋白部分取代,得到含有表达盒的pEGFP-G<,2>,用AseI和MluI双酶切可游离出此表达盒,在此表达盒中启动子是CMV,终止信号是SV40 polyA;将此表达盒放入含CAV-2 E3区的载体中,并将E3区作部分缺失;把重组后的E3区放回含CAV-2全基因组的质粒中,游离重组的基因组后转染MDCK细胞,包装出表达盒正、反向插入E3区的重组犬-2型腺病毒;将两株重组腺病毒免疫幼犬,在幼犬体内产生了针对狂犬病病毒的抗体.