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分子印迹壳聚糖/聚丙烯酰胺半互贯网络水凝胶用于血红蛋白的识别

摘要

本文在血红蛋白印迹分子的存在下,以一定浓度丙烯酰胺和壳聚糖为功能单体、适量的N,N ' -亚甲基双丙烯酰胺为交联剂,过硫酸钾-亚硫酸氢钠为氧化还原引发体系,氮气保护下室温进行聚合得到血红蛋白印迹的半互贯网络凝胶(MIH-s-IPN )。将该凝胶过26 目筛子,得到小颗粒凝胶。该凝胶用含10 %SDS(w/v)的醋酸水溶液(1 %v/v )洗脱去蛋白质分子,然后在0.01M 的磷酸二氢钠缓--磷酸一氢钠缓冲溶液中平衡24 小时后,用于吸附蛋白质。通过该法得到的分子印迹水凝胶不仅具有良好的亲水性,而且对印迹蛋白的吸附量和选择性也很高。等温吸附曲线(Fig.1)表明,印迹的半互贯网络凝胶(MIH-s-IPN )对血红蛋白的吸附量要高于非印迹的半互贯网络凝胶(NIH-s-IPN )。该印迹水凝胶对印迹分子血红蛋白的吸附吻合Langmuir 吸附方程,吸附常数b 和饱和吸附量Qmax 分别为4.27g/ml 和36.53mg/g 湿介质。在以牛血清白蛋白为参考底物的选择性的实验中,结果表明印迹的半互贯网络不仅对印迹分子血红蛋白的吸附容量远高于相同组分的非印迹半互贯网络,而且对血红蛋白的选择性也很高。

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