氟对成纤维细胞与成骨细胞增殖及ALP、BMP2和cbfa1表达的影响

摘要

目的：探讨不同剂量氟在不同时间段对成纤维细胞和成骨细胞增殖活性以及调节成骨功能的几种重要细胞因子ALP、cbfal和BMP-2的影响,观察氟化物对成骨细胞和成纤维细胞影响的异同,并探讨这种影响在氟中毒骨周化骨中的作用. 方法：培养小鼠成纤维细胞株(L929)和小鼠颅骨来源的成骨细胞,采用四唑盐比色法(MTT)测定细胞增殖率,酶联免疫吸附(Elisa)法测定培养细胞上清液中ALP、BMP-2和cbfa1. 结果：加氟0.001、0.002mg/L1h,染氟0.001mg/L2h成纤维细胞的增殖活力明显增加;染0.001mg/L～1mg/L1h,2h,48h～96h,成骨细胞增殖活力多呈明显升高趋势;成纤维细胞染氟10mg/L72h可使cbfa1明显升高;染氟20mg/L72h可使BMP-2明显升高;成骨细胞染氟72h除20mg/L组ALP活性无明显升高外,其他各组ALP、BMP-2和cbfa1均明显升高. 结论：适宜的较低浓度氟对成纤维细胞的增殖呈明显促进作用.成纤维细胞加氟可使cbfa1自48h开始在一定氟剂量组明显升高,认为氟刺激可能调动了原本在成纤维细胞内沉默的cbfa1基因,使成纤维细胞具备了成骨的功能.同时,成纤维细胞染氟20mg/L2hBMP-2亦明显升高,进一步证实了氟对成纤维细胞成骨功能的诱导和促进作用.相同条件处理的成骨细胞,除20mg/L组ALP活性无明显升高外,其他各组ALP、BMP-2和cbfa1均明显升高.上述的实验结果从一个侧面提示了氟对成纤维细胞成骨功能的刺激作用,为氟中毒骨周化骨发生机制的研究提供了一个重要佐证.