HPLC法测定血清中甲氨蝶呤浓度方法的优化

摘要

目的：建立及优化准确、简便的测定人血清中甲氨蝶呤浓度的HPLC方法.方法：色谱柱：ACE5C18-AR柱;流动相：甲醇-3％冰醋酸溶液(pH3.5)(20：80);检测波长：306nm;柱温：40℃.血清样品用高氯酸沉淀蛋白,取上清液,再用氢氧化钠中和后,取40μL进样分析.结果：色谱峰分离良好,无干扰.低浓度标准曲线(0.05～3.40μmol·L-1)线性良好,r=0.9997;高浓度标准曲线(3.40～220.0μmol·L-1)线性良好,r=0.9997.日内及日间RSD均＜5.0％.结论：本优化方法操作简便、灵敏准确,且重现性好,适用于甲氨蝶呤血药浓度检测.