新型光探针的合成及其细胞内H2O2的检测

摘要

建立高选择性、高灵敏度、低毒性检测生物体内活性氧的方法是目前生化分析急需解决的关键问题.已报道的活性氧荧光检测方法多利用其氧化机理,导致选择性差,很难对某一种活性氧准确定量.本文新合成的荧光素二对甲基苯磺酸酯(λex/λem=493/515nm)能高选择性、高灵敏度地检测细胞内H2O2的含量(在8.00×10-11～2.00×10-7mol/L范围内,探针对H2O2响应呈线性关系,检出限2.63×10-13mol/L).文中用IR、1HNMR、13CNMR、元素分析对该探针的结构进行了表征;研究了化学环境下该探针与H2O2的非氧化机理反应,讨论了pH值、H2O2浓度、反应温度、反应时间及其他活性氧对测定反应条件的影响;同时研究了生理环境下(pH=7.4)该探针与巨噬细胞内H2O2的反应,在荧光显微镜下细胞逐渐呈现出强荧光,可用于单细胞内H2O2的识别与检测.