离子交换层析分离重组乙肝病毒表面抗原过程中的介质筛选及条件优化

摘要

探索汉逊酵母表达的重组乙肝病毒表面抗原HBsAg（y-HBsAg）在离子交换介质上的分离。首先考察GE Healthcare 公司生产的DEAE-Sepharose FF 用于y-HBsAg 分离纯化的可行性，并优化了其层析条件，同时考察了采用本课题组所建立的包括离子交换层析在内的分离纯化工艺制备y-HBsAg 纯品的可行性。此外，还考察了自制介质DEAE-Sepharose 6FF 用于y-HBsAg 分离纯化的可行性。结果表明，两种介质的性能相当，单步的HBsAg 回收率和纯化倍数分别可以达到60﹪和3 左右，包括离子交换层析在内的分离纯化工艺能够以20﹪左右的HBsAg 回收率得到HBsAg 纯品。此外，自制介质DEAE-Sepharose 6FF 也可用于中国仓鼠卵巢细胞表达的HBsAg（CHO-HBsAg）的分离纯化，应用前景广阔。