检测CSFV、JEV、PRRSV三种猪RNA病毒多重RT-PCR方法的建立

摘要

猪瘟病毒(CSFV)、流行性乙型脑炎病毒(JEV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起严重的种猪繁殖障碍的病原,而且经常混合感染,及时准确的诊断是防治前提.根据GenBank发表序列选取三对引物建立检测CSFV、JEV和PRRSV病毒的多重RT-PCR方法,扩增产物分别为508bp、380bp、263bp.经与IDEXX商品化的检测CSFV抗原试剂盒比较,二者的符合率为96.7％;扩增JEV和PRRSV PCR产物分别经EcoR V和Sau3A Ⅰ酶切得到预期的片段.建立的多重RT-PCR检测JEV、PRRSV和CSFV敏感度分别为12.5个TCID50、10个TCID50和10-3ng总RNA.结果表明该多重RT-PCR方法具有很好的特异性和敏感性,可用于临床三种病毒核酸的检测.