小鼠骨髓来源成熟状态树突状细胞的体外诱导培养及鉴定

摘要

目的:探讨短期内获得大量成熟状态小鼠树突状细胞(DC)的方法.方法:取小鼠的骨髓细胞分别加入重组小鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rmGM-CSF)100ng/ml、重组小鼠白细胞介素4(rmIL-4)100ng/ml于15％胎牛血清(FBS)的IMDM完全培养基中培养7天,用光学显微镜、流式细胞仪、CCK-8淋巴细胞增殖检测试剂盒分别观察其形态、细胞表面免疫标志和刺激淋巴细胞增殖的能力.结果:平均每只小鼠可获得约3×107个骨髓细胞,培养7天后可收获细胞约6×107.细胞具有明显的突起,表面高表达MHC Ⅱ类分子、CD80和CD86分子,尤以CD80高表达为主,DCs纯度达60-70 ％,DC可明显刺激同种脾脏淋巴细胞增殖.结论:应用小鼠骨髓来源的细胞,加入细胞因子rmGM-CSF和rmIL-4培养7天,能够在短期内获得大量成熟状态的树突状细胞.