带有IL-2基因佐剂的乙肝病毒DNA疫苗构建及其免疫效果的观察

摘要

目的：构建带有白细胞介素Ⅱ蛋白佐剂基因的乙肝病毒DNA疫苗.rn 方法：将微小病毒内部核糖体进入位点基因克隆到质粒pVAX1栽体多克隆位点，构建出DNA疫苗双表达载体pVAX1.将PCR扩增出的白细胞介素Ⅱ基因和HBsAg基因分别连接在IRES基因的两侧，构建出能同时表达HBsAg和IL-2蛋白佐剂的乙肝病毒DNA疫苗pHII。通过脂质体介导方法将pHII转染到COS-7细胞中，用HBsAg检测试剂盒检测瞬时表达的结果.实验组的BALB／c小鼠用pHII免疫(100ug／只)，阳性对照组用pVAX／HBs免疫(100ug／只)，阴性对照组用pVAX1免疫(100ug／只)，并分别于第2周、第4周后加强免疫1次，检测免疫后小鼠血清中HBsAb量.13周后处死小鼠，用流式细胞仪检测其脾脏T细胞表面CD4+、CD8+分子的数量.rn 结果：在转染pHII质粒的COS-7细胞上清液中有HBsAg和IL-2的表达.第2周和第4周时，实验组和阳性对照组小鼠血清中分别检测出HBsAb，而阴性对照组未测出HBsAb，以上三组均未检测出HBsAg.rn 结论：通过对实验组与阳性对照组统计结果的分析，表明带有IL-2蛋白佐剂基因的乙肝DNA疫苗的免疫效果要明显优于不带有分子佐剂基因的乙肝DNA疫苗.