人颗粒酶B的表达及抗原性初步分析

摘要

目的：扩增人颗粒B(GrB)酶原型及活性型序列,在原核系统对其进行表达,并对其表达产物的抗原性进行初步分析。方法 从人外周血淋巴细胞中抽提RNA,用RT-PCR方法扩增人颗粒酶B序列,将其克隆至pGEX-5x-1重组表达质粒,与GST进行融合表达,用SDS-PAGE及western blot对表达产物进行分析。结果 已对GrB酶的序列进行了克隆和测序,其序列与已报道的从人体分离出的GrB完全一致。酶原型和活性型GrB与GST的融合蛋白以包涵体的形式表达,其大小与预期结果一致,并能与GrB特异性抗体发生结合反应。结论 已成功建立了GrB原核表达系统,酶原型及活性型GrB均具有抗原性。