裂解基因E和核酸酶基因串连表达载体的构建及大肠杆菌菌影的制备

摘要

通过扩增PhiX174噬菌体裂解基因E，并对该基因进行克隆、鉴定及序列测定，将该基因亚克隆到原核表达载体pGEx-6P-1，成功构建了大肠杆菌菌影的表达载体pGEX-E。在E基因基础上与辅助基因葡萄球菌核酸酶A(SN)基因串连，并插入pGEX-6P-1载体，构建了双基因串连制备大肠杆菌菌影的高效表达载体pGEX-E-5aaLinker-sN，pGEX-E-15aaLinker-SN，采用Cacl2法将其转入大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG诱导后成功获得了大肠杆菌菌影，为进一步研究菌影这一新型的疫苗及佐剂形式奠定基础。