榆黄蘑ISSR-PCR条件优化

摘要

本试验以改进的CTAB法提取榆黄蘑菌丝体的总DNA,研究模板DNA量、引物浓度、dNTPs浓度、Mg<'2+>浓度、TaqDNA聚合酶用量等对ISSR-PCR的影响,优化PCR反应体系。试验结果,ISSR-PCR条件为:模板50ng/25μl,引物浓度0.42μmol/L，dNTPs 100μmol/L，Mg<'2+> 1. 5mmol/L. TaqDNA聚合酶2.0U，10×buffer2.5μl,用ddH<,2>O将总体积补至25μl,退火温度为42℃。