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BYDV-GAV运动蛋白的表达、纯化、抗血清制备与检测

摘要

运动蛋白(MP)是病毒基因编码的,介导病毒在宿主细胞间运动非常重要的蛋白。对MP蛋白定量和在植株体内进行跟踪研究是研究其功能的重要基础。而MP蛋白在发病植株体内含量很低,很难得获得纯化的MP蛋白。本研究将BYDV-GAV MP的全长基因克隆到表达载体pET-21b中,表达带HIS标签的融合蛋白,采用Ni柱进行亲和纯化,获得纯化的MP融合蛋白。免疫小鼠制备了抗MP血清。抗血清效价为1:10000,并在接种发病植株中检测到MP蛋白,其含量为0.5-1μg/g鲜重叶片。

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