FISH技术对亚硝酸盐氧化菌的定量解析

摘要

荧光原位杂交(Fluorescence in Situ Hybridization,FISH)技术作为一项对细胞以及微生物研究的有效手段,可以定性及定量的对绝人多数微生物进行实时观测研究。利用基于亚硝酸盐氧化菌(nitrite-oxidizing bacteria,NOB)16SrRNA序列的荧光探针,优化针对亚硝酸盐氧化菌的FISH技术实验条件.确定了FISH技术定量检测亚硝酸盐氧化菌的具体方法,并优化了样品与处理的实验条件为热固定2h,4%多聚甲醛固定15min,乙醇脱水5min；杂交过程的实验条件为杂交温度46℃,杂交时间3h,洗脱液中NaCl浓度60mmol·L-1。