外源基因在毕赤酵母中表达的影响因素及优化策略

摘要

@@巴斯德毕赤酵母((Pichia pastons)自上世纪80年代初被开发为外源蛋白表达系统以来一直受到人们的重视.迄今为止,已有400多种外源蛋白在此体系中成功表达.与其他的表达系统相比,毕赤酵母表达系统主要有以下优势：①表达量约为细菌或哺乳动物细胞等表达系统表达量的10-100倍;②由于巴斯德毕赤酵母无内源犁载体,目的基因一般通过同源重组稳定地整合在酵母染色体上,并随染色体的复制而复制,故构建的重组菌十分稳定：⑦毕赤酵母不产生毒素,是非常安全的基因工程受体系统：④具有较强的且易控制的乙醇氧化酶基因(alcohol oxidase,AOX)启动子,可严格控制外源基因的表达;⑤由于巴斯德毕赤酵母是低等真核生物,细胞生长快,易于培养,遗传操作简单,具有真核生物的翻译后加工等功能,故可使目的蛋白得到正确的空间构象及更高的生物活性;⑥该表达系统有多种受体菌和表达载体供选择,以进行胞内表达或分泌表达,有利于产物的提纯.⑦既克服了大肠杆菌不能表达结构复杂蛋白质等缺陷,又弥补了哺乳类细胞及昆虫细胞表达系统操作复杂、产业化生产成本高的不足.由于上述诸多优点,该表达系统目前已被认为是最具有发展前景的规模化生产基因工程产品的工具之一.