国人瘦素基因原核重组表达载体的构建及鉴定

摘要

目的：构建并鉴定瘦素基因原核重组表达载体。rn 方法：以RT-PCR法自人脂肪组织制备目的基因，应用DNA重组技术克隆至pGEM-T载体与pGEX-4T-1原核表达载体，转化大肠杆菌DH5α，EeoRⅠ+XhoⅠ双酶切及测序鉴定.rn 结果：扩增得到520bp目的基因并构建原核重组表达载体pGEX-4T-1-leptin.双酶切电泳见520bp目的条带，测序结果与GenBank收录序列一致。rn 结论：成功构建原核表达载体pGEX-4T-1-leptin，为leptin功能研究及进一步的临床应用提供了条件。