荧光相关光谱药物筛选新方法研究

摘要

本文基于荧光相关光谱(FCS)技术和亲和探针竞争反应，提出了一种高灵敏、微体积的药物筛选新方法。该方法以筛选酪氨酸蛋白激酶ABL抑制剂为模型，基于候选化合物竞争性地与荧光药物探针-靶蛋白复合物结合反应，以及FCS技术具有高灵敏地区分游离荧光探针及荧光探针-靶蛋白复合物能力，首先，以蛋白激酶抑制剂筛选白的解离常数，该方法的结果与文献报道值基本一致，拟合相关系数Rz值大于0.986，拟合残差小于0.07。为了进一步减小样品体积，制备了PDMS／玻璃微孔芯片，成功地用于FCS分析，将样品需求量降低到1μL。与现有的方法相比，新方法的优势在于：灵敏度高、通用性好、样品需求低，无需对待筛化合物或激酶进行标记，可实现待测化合物与靶标分子的亲和力的评估。方法有望成为用于筛选小分子药物的高通量筛选平台。