反相高效液相色谱-荧光检测法测定尿液儿茶酚胺的浓度

摘要

目的：建立简便准确的高效液相色谱-荧光法检测尿液中儿茶酚胺的浓度。方法：通过自制氧化铝固相萃取小柱对尿液样本预处理，以DHBA为内标，色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18(250×4.6 mm，5μn)；流动相为甲醇：0.02 mol.L-1磷酸二氢钾=2:98(ν：υ)(含有0.2mmol·L-1乙二胺四乙酸二钠)；流速0.9 mL·min-1；进样量：20 μL，柱温：23℃；荧光检测器，λEx为286 nm，λEm为318nm。结果：去甲肾上腺素的线性范围为3.6～115.2 ng·mL-1，肾上腺素的线性范围为14.85～475.2 ng·mL-1，多巴胺的线性范围为28.65～916.8 ng·mL-1，且均呈良好的线性关系，三种物质的提取回收率约为80%左右，有较好的精密度(RSD＜7%)，并且在避光条件下保存，三种物质能保持稳定，对测定结果无影响。结论：本法灵敏且准确可靠，可以作为测定尿液中儿茶酚胺浓度的方法，用于临床测定，并应用于相关疾病的研究。