大肠埃希氏菌周质抗体细胞释放工艺方法研究

摘要

本文应用细胞裂解液提取法、超声波细胞破碎法、细胞冻融法、bugbuster提取法和高压细胞破碎法，对比研究了从大肠埃希氏菌周质中提取可溶性抗体的相关参数，并通过SDS-PAGE电泳，BCA蛋白浓度测定和ELISA法检测了上述四种方法的有效性。结果表明，对于试验室小试规模的抗CEA抗体的细胞释放，超声法破碎，提取的目的抗体量最多，优于细胞裂解液提取法，冻融法和bugbuster法，最佳条件为：细胞缓冲液与湿菌体的比例为5ml／g，磁力搅拌混匀，冰浴中以250W功率，超声波破碎：4秒工作5秒间隔140次。另外，对于大规模抗体的制备，高压破碎仪在850Pa下，破碎两次效果最佳。