小鼠胚胎背主动脉来源的间充质干细胞的迁移特性

摘要

人们对间充质干细胞(MSC)在早期胚胎的发育规律及迁移特性知之甚少，由于小鼠MSC分离和培养困难，对其了解更少。我们通过优化培养和诱导分化条件，从E11.5小鼠胚胎DA(dorsal aorta)分离得到真正的MSC，简称为DA-MSC，具有均一的免疫表型(CD31-F1k1-CD45-CD34-CD11b-F14/80-CD44+CD29+CD105+Scal+)，表达周细胞的标记(α-SMA+NG2+PDGFRα+PDGFRβ+)，具有向脂肪、骨、软骨三系分化的功能。有趣的是，在DA—MSC出现后24 h，E12.5的循环血同样也具有三系分化功能的MSC，提示MSC作为造血干细胞(HSC)的微环境细胞，是否也像HSC在血管下产生模型(Bubaortic generation model)显示的那样，具有迁移的特性，能够穿越内皮，进入血液循环，进而迁移到其他造血位点呢?我们通过体外Transwell迁移实验，发现E12.5胚胎循环血、内皮细胞条件培养液能够显著地趋化DA-MSC的迁移，并发现主要通过PDGF和TGF的受体介导的通路影响其迁移，而bFGF的受体介导的通路不影响迁移。rn 进一步发现下游的JNK和AKT通路能够影响循环血、内皮细胞和PDGF-BB介导的迁移，而ERK和P38通路不起作用。同时我们发现这些通路在循环血介导的人DA—MSC的迁移中的作用保守。在小鼠DA区发现MSC和PDGF—BB通路在DA-MSC的迁移中发挥重要作用，为下一步利用PDGFRb-Cre的小鼠研究间充质干细胞的发育起源、体内迁移以及DA-MSC与成体骨髓来源的间充质干细胞的亲缘关系建立了良好的基础。